《表3 恢复培养基对休眠芽超低温保存后成活率的影响》

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《软枣猕猴桃休眠芽超低温保存技术研究》


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‘魁绿’休眠芽经过0.3 mol·L-1蔗糖+1 mol·L-1甘油的MS预培养液培养2 d,装载20 min,PVS2脱水处理120 min,换新鲜PVS2浸入液氮超低温保存,化冻后转入不同的恢复培养基中结果见表3。在不含激素的培养基中成活率最低为28.33%,加入不同浓度的NAA和6-BA,成活率显著提高。当加入0.01 mg·L-1NAA时,6-BA的浓度对成活无显著影响;恢复培养基中6-BA定量时,加入0.02 mg·L-1NAA休眠芽成活率显著高于加入0.01 mg·L-1NAA。在恢复培养基MS+0.02 mg·L-1NAA+2mg·L-16-BA上,超低温保存后“魁绿”休眠芽的成活率最高,达86.30%。在该培养基上,休眠芽超低温保存7 d后开始吐绿成活(图6-A、B),10周后成活休眠芽可长成正常植株(图6-C)。试验也发现休眠芽再生时直接发育为植株,未经过愈伤组织等阶段,这样大大降低了遗传变异的概率。图6-D是正常光照下未经超低温保存的‘魁绿’休眠芽发育的植株,二者形态上无明显差异。