《表2 3种药物的Papp值》

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《Caco-2细胞模型不同取样方式对药物表观渗透系数的影响》

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将培养至21 d的Transwell 12孔板用PBS缓冲液清洗，洗涤2～3次，并在AP侧加入0.5 m L Hank’s平衡盐溶液，BL侧加入1.5 m L Hank’s平衡盐溶液平衡15min。之后将两侧Hank’s平衡盐溶液吸出，并在AP侧加入0.5 m L给药溶液（酒石酸美托洛尔、阿替洛尔、甲硝唑均为100μg·m L-1），并在Transwell板BL侧加入1.5 m L Hank’s平衡盐溶液作为接收液，各设置3个复孔，实验过程为120 min，于给药后20、40、60、80、100、120 min时分别吸取200μL接收液作为间隔取样细胞样品，并及时补充等体积的空白Hank’s平衡盐溶液。将培养至21 d的Transwell 12孔板用PBS缓冲液清洗，洗涤2～3次，并在AP侧加入0.5 m L Hank’s平衡盐溶液，BL侧加入1.5 m L Hank’s平衡盐溶液平衡15 min。之后将两侧Hank’s平衡盐溶液吸出，并在AP侧加入0.5 m L给药溶液（酒石酸美托洛尔、阿替洛尔、甲硝唑均为100μg·m L-1），并在Transwell板BL侧加入1.5 m L Hank’s平衡盐溶液作为接收液，各设置3个复孔，实验过程为120 min，于实验结束时，从BL侧吸取200μL接收液作为单次取样细胞样品。采用“1.2.3”项下色谱条件，测定离心样品中3种药物的浓度，根据公式“Papp=d Q/dt×A×C0”计算Papp（表2）[7]。d Q/dt为单位时间内药物的转运量，为药物累计释放量Q对时间t线性回归的斜率，A为Transwell 12孔板膜底面积，本实验为12孔板，底面积为1.12 cm2，C0为AP侧药物初始浓度（μg·m L-1）。3种药物的两种取样方式所得Papp值均无较大差异（P>0.05）。