《表1 HCV NS3/4A、NS5A、NS5B区扩增和测序引物》

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《聚乙二醇干扰素联合利巴韦林治疗对基因1b型慢性丙型肝炎患者预存耐药相关替代的差异性分析》

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从每份样本中取140μl血清，应用QIAamp viral RNA mini kit(Qiagen公司，德国）提取HCV RNA。参照文献[2-3]合成引物（北京博迈德科技发展有限公司）并配至10μmol/L，见表1。应用PrimeScriptTM One Step RT-PCR Kit Ver.2(Takara，大连），巢式PCR扩增HCV NS3/4A、NS5A、NS5B区基因片段：分别以HCV NS3F1/HCV NS3R1、NS5AF1/NS5AR1、NS5BF1/NS5BR1为外侧引物进行第1轮扩增；采用TaKaRaTaqTM Version2.0 plus dye(Takara，大连），以HCV NS3F2/HCV NS3R2、NS5AF2/NS5AR2、NS5BF2/NS5BR2为内侧引物进行第2轮PCR反应。