《表1 RT-qPCR引物列表》

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《盐角草在Cd、Pb、Li污染盐土修复中的应用潜力》


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分别收取不同处理下的盐角草地上部分,用液氮研磨成粉末。采用Trizol法提取RNA,参照TransScript One-Step gDNA Removal and cDNA Synthesis SuperMix(购自全式金公司)试剂盒说明书进行RNA样品的反转录。从盐角草转录组[14]中搜索编码抗氧化物酶的unigenes,并在NCBI网站(https://blast.ncbi.nlm.nih.gov/Blast.cgi)上进行Blast确认。相关基因的引物信息见表1。采用qRT-PCR方法检测抗氧化物酶基因的表达量。所用仪器为Stratagene Mx3000P(购自Agilent公司),所用试剂为THUNDERBIRD SYBR?qPCR mix(购自TOYOBO公司)。设定反应程序为:95℃预变性1 min;95℃变性15 s,55℃退火20 s,72℃延伸30 s,40个循环;融解曲线分析:95℃,15 s;55℃,30 s;95℃,30 s。以Setubulin基因为内参,采用2–ΔΔCt法[15]计算基因的相对表达量。