《表1 引物序列:多肽化合物urantide抑制动脉粥样硬化大鼠心脏Ⅰ型胶原的表达》
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《多肽化合物urantide抑制动脉粥样硬化大鼠心脏Ⅰ型胶原的表达》
心脏放入液氮中速冻,供分子生物学检测。具体如下:(1)RIPA裂解液提取心脏组织蛋白并进行定量。取45μg蛋白经SDS-PAGE分离并转膜、封闭,一抗:β-actin(1∶5000)、ColⅠ(1∶1000)4℃孵育过夜。TBST洗膜,加入HRP标记抗兔或鼠二抗(1∶5000),室温孵育l h后显影。利用Image J 1.46软件检测蛋白条带灰度值,以目的蛋白与内参蛋白条带的灰度值比值作为其相对表达水平;(2)Trizol法提取心脏组织总RNA并进行定量,反转录合成cDNA后,荧光定量检测ColⅠ、β-actin mRNA的ct值。以ColⅠ与β-actin mRNA ct值的差值为△ct,应用2-△△ct法计算其目的基因的相对表达水平。引物由宝生物工程(大连)有限公司合成。引物序列见表1。
图表编号 | XD00134273000 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2020.02.06 |
作者 | 杨舒涵、王博、孙美莎、曹宇光、王怡宁、崔海鹏、赵娟 |
绘制单位 | 承德医学院病理生理学教研室、承德医学院病理生理学教研室、承德医学院病理生理学教研室、承德医学院病理生理学教研室、承德医学院病理生理学教研室、承德医学院病理生理学教研室、承德医学院病理生理学教研室 |
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