《表1 外源酚酸处理浓度梯度》

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《酚酸类物质对苜蓿种子萌发的化感作用研究》

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称取（A）对羟基苯甲酸、（B）绿原酸、（C）香豆素、（D）阿魏酸、（E）咖啡酸各1g分别溶于4mL无水乙醇中，定容至1L，配制成1.00mg/mL母液，放入4℃冰箱备用（分别以A、B、C、D、E表示）。将母液稀释至500、50、5、0.5mg/L的溶液（分别以A4、A3、A2、A1；B4、B3、B2、B1；C4…E1表示，表1），采用玻璃培养皿法。在直径9cm的玻璃培养皿底部铺两层灭菌滤纸，分别均匀摆放灭菌（用75%酒精消毒3~5min后再用蒸馏水冲洗种子4~6次）处理的苜蓿种子30粒，加入5mL不同浓度的酚酸溶液（500、50、5、0.5mg/L），每个处理重复3次，置于光周期25℃、12h，暗周期20℃、12h的人工气候箱中发芽。种子发芽的标准为胚根突破种皮1~2 mm[15-17]，每两天补充相应的酚酸溶液，对照添加蒸馏水2mL，每天定时记录发芽种子数。第7d统计苜蓿的发芽率、发芽势（经预试验，在该试验条件下，培养3d时苜蓿达到发芽高峰期，培养至4d后不再萌发，故采用培养3d的数据测定其发芽势）、胚根长和胚轴长。5d后切取主根根端1cm根段，在ZEISS Observer D1体式显微镜下，Axio Cam MRC5型显微数码摄影仪系统10倍放大视野下观察苜蓿根毛形态并拍照，用显微测量软件测量根毛长度。每组处理测量5个根段，每根段上测量10根根毛，计算根毛的平均长度，重复3次[18]。