《表1 Real-time PCR引物信息》

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《甜瓜Dof家族全基因组鉴定与表达分析》


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利用植物总RNA提取试剂盒RNAprep pure Plant Kit(天根)提取样品RNA。第一链cDNA用TransScript?All-in-One First-Strand cDNA Synthesis SuperMix(全式金)合成。20μL Real-time PCR体系:0.5μL cDNA模板,上、下游引物各0.5μL(10μmol·L-1,表1),10μL Top Green qPCR SuperMix(全式金)和8.5μL ddH2O。PCR程序为:95℃300 s;95℃10 s,58℃10 s,72℃10 s,共45个循环;95℃10 s,65℃60 s,97℃1 s(张焕欣等,2017)。每个样品3次重复。以甜瓜CmACT作为内参基因(Kong et al.,2014)。基因相对表达水平分析参照Livak和Schmittgen(2001)的方法。试验结果采用最小显著差异法进行差异显著性比较分析(P<0.01)。