《表4 用于定量PCR分析hdac基因表达水平的引物序列表》

《表4 用于定量PCR分析hdac基因表达水平的引物序列表》   提示:宽带有限、当前游客访问压缩模式
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《敲除组蛋白去乙酰化酶基因hdac对里氏木霉纤维素酶表达的调控作用》


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使用反转录试剂盒,以Random primer为引物,将约100 ng RNA反转录成c DNA。使用荧光定量PCR仪迚行荧光定量PCR。PCR反应体系(20μL):模板4μL,ROX Reference Dye 0.4μL,Bestar?SybrGreen qPCR Mastermix 10μL,上、下游引物(20μmol/L)(表4)各0.5μL,RNase Free H2O 4.6μL。PCR反应条件:95°C 2 min;95°C10 s,55°C 31 s,40个循环。运行结束后得到融解曲线,用以核对PCR产物的特异性。所有PCR反应样品做3个复孔。目的基因表达量通过内参基因sar1校正。以对照菌株表达量为1,其他转化子的表达量与对照样品的比值作为数据分析。