《表1 六种常见毒力基因引物序列》

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《泡菜源屎肠球菌Enterococcus faecium R2的环境胁迫耐受性及安全性评价》

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将屎肠球菌R2接种到MRS培养基中，37℃下静置培养16 h，离心收集沉淀，按照细菌基因组DNA快速抽提试剂盒方法提取屎肠球菌R2基因组DNA。以基因组DNA为模板，用PCR扩增屎肠球菌R2的毒力基因，毒力基因的引物序列如表1所示，引物均由安徽滁州通用生物系统（安徽）有限公司合成。RCR反应体系:10μmol/L上下游引物各1μL、模板DNA 1μL、2×Taq PCR StarMix 10μL、补充ddH2O至25μL，设阴性对照。退火温度分别为52℃（gelE和efa A）、56℃（cylA、asa1和esp）、58℃（hyl）。其余PCR条件为:94℃预变性5 min，94℃变性1 min，退火30 s，72℃延伸1min，共35个循环，最后72℃充分延伸5 min。PCR结束后，将扩增产物置于含EB的1.0%（质量分数）琼脂糖凝胶中进行电泳，并拍照分析。