《表2 耐药基因引物序列:泡菜源屎肠球菌Enterococcus faecium R2的环境胁迫耐受性及安全性评价》

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《泡菜源屎肠球菌Enterococcus faecium R2的环境胁迫耐受性及安全性评价》


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以基因组DNA为模板,PCR扩增屎肠球菌R2的万古霉素耐药基因,耐药基因的引物序列如表2所示,引物均有安徽滁州通用生物系统(安徽)有限公司合成。RCR反应体系:10μmol/L上下游引物各1.0μL、模板DNA 1.0μL、2×Taq PCR StarMix 12.5μL、补充ddH2O至25μL。阴性对照模板以1.0μL ddH2O代替。PCR条件为:94℃预变性5 min,94℃变性1min,54℃退火1 min,72℃延伸1min,共30个循环;最后72℃充分延伸10 min;4℃保存。PCR结束后,将扩增产物置于含EB的1.0%琼脂糖凝胶中进行电泳,并拍照分析。