《表1 qRT-PCR引物序列》

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《LncRNA AFAP1-AS1在子宫内膜癌中的表达及临床病理参数与预后的关系》


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-80℃冰箱中取出组织样本,提取总RNA,检测合格后,利用PrimeScriptTMRT reagent Kit with gDNA Rraser试剂盒进行RNA反转录,收集产物cDNA。利用实时定量PCR(quantitative reverse transcription-PCR,qRT-PCR)法检测组织中LncRNA AFAP1-AS1表达水平,内参基因为GAPDH基因,试剂盒购自美国Applied Biosystens公司,操作严格按照试剂盒说明书进行。qRT-PCR反应体系为25μL:SYBR Advantage Premix(2×)12.5μL,cDNA 1μL,ddH2O为9.5μL,正向引物1μL,反向引物1μL。反应条件如下:94℃5 s,58℃20 s,72℃30 s,45个循环。相对表达量根据2-ΔΔΔCt法计算。引物由上海生工生物工程公司合成,引物序列见表1。