《表1 引物序列：补肾益气活血方对胚胎着床障碍大鼠子宫内膜孕激素受体和信号传导与活化转录因子3表达的影响》

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《补肾益气活血方对胚胎着床障碍大鼠子宫内膜孕激素受体和信号传导与活化转录因子3表达的影响》

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从-80℃冰箱中取出适当保存的子宫胚胎标本，在冰面上解冻数分钟后，将组织放入无菌的一次性培养皿中，刮取子宫内膜组织（第8天子宫组织在体视显微镜下小心去除胚胎），加入1 mL预冷的Trizol裂解液，在冰上充分碾磨，按试剂盒说明书步骤提取内膜组织总RNA，各管取2μL检测样本RNA的纯度和浓度，A260/A280在1.8～2.0便可进入下一步逆转录过程。根据公式（2μg样本=浓度μg/μL×体积20μL=样本体积+Mix体积+dH2O体积）计算出样本和dH2O的体积，进行逆转录反应。用逆转录所得的cDNA做模板，进行RT-PCR扩增，SYBRPremix Ex TaqTM（2×）10μL、Rox Reference Dye（50×）0.4μL、稀释后上游引物（10μm）0.4μL、稀释后下游引物（10μm）0.4μL、cDNA 2μL和RNase-Free H2O组成20μL反应体系，每个样本做3个平行复孔，以β-actin为内参。采用Comparative Delta-delta CT法，每个标本的相对RNA含量通过2-ΔΔCT计算得到。具体引物序列见表1。