《表2 体系中模版与引物的用量单位:μL》

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《山羊痘病毒与小反刍兽疫病毒双重PCR检测方法的建立》


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使用超微量分光光度计,对GTPV DNA与PPRV cDNA浓度分别进行检测,发现GTPV DNA浓度为28.3 ng/μL,PPRVcDNA浓度为645.9 ng/μL。由于核酸浓度差距较大,将模板与引物比例进行了优化,具体见表2。将提取出的GTPV DNA和PPRV cDNA进行双重PCR,在20μL体系中,按表2中的引物比例,加入4条引物以及dNTPs 1.6μL、10×Buffer 2μL、r Taq酶0.1μL;模板GTPV DNA与PPRV cDNA按照表2中比例加入,用ddH2O补齐至20μL。按上述PCR程序进行PCR扩增,用1%琼脂糖凝胶电泳检测扩增结果。