《表1 定量PCR扩增引物》

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《模拟氮沉降对贝加尔针茅草原土壤氮转化微生物的影响》


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定量PCR检测:土壤固氮基因nifH、氨氧化细菌AOB、氨氧化古菌AOA和反硝化细菌定量扩增引物见表1。扩增反应体系总体积为20μL,包括2×GoT-aq?qPCR Master Mix 10μL,10μmol·L-1的上下游引物各0.5μL,DNA模板2μL(1~10 ng),灭菌超纯水7μL。将加好样的96-PCR板置于荧光定量PCR仪进行扩增反应,每个样品3个重复。扩增反应条件为95℃预变性30 s;95℃变性5 s,60℃退火40 s,72℃延伸30 s,40个循环。