《表1 PCR实验中的引物序列及产物片段长度》
提示:宽带有限、当前游客访问压缩模式
本系列图表出处文件名:随高清版一同展现
《不同环境条件下Pseudomonas sp.脱氮特性及功能基因表达差异研究》
注:*用于Q-PCR实验的引物.
为进一步探究不同环境条件对菌株脱氮特性影响的机理,Q-PCR技术测定菌株脱氮相关的功能基因(amo A,nap A,nirS,cnor B和nos Z)在不同环境条件下的表达量.采用RNAprep pure Cell/Bacteria Kit(天根生化,北京)对菌株总RNA进行提取.以提取的RNA为模板,用PrimeScript?RT reagent Kit(Ta Ka Ra,日本)反转录合成互补DNA.各功能基因的引物序列参照菌株全基因组序列进行设计,引物序列如表1所示.菌株的16S rDNA作为内参基因来校正不同样品中c DNA含量的差异.将各样品的c DNA样品进行梯度稀释,并分别绘制各功能基因和内参基因的标准曲线.同时用SYBR GreenΙ法对各样品的目标基因及内参基因进行Q-PCR检测.PCR反应程序:95℃预变性10min;之后进入40个循环,包括95℃下变性5s,60℃退火40s收集荧光,72℃下延伸30s;循环结束后72℃下延伸10min.每个样本检测3个复孔,数据采用2-ΔΔCT法进行分析.
图表编号 | XD00109363000 严禁用于非法目的 |
---|---|
绘制时间 | 2019.10.20 |
作者 | 王秀杰、王维奇、张阳、孙志涛、张晶、梁东博、侯连刚、张凯、李军 |
绘制单位 | 北京工业大学建筑工程学院、北京工业大学建筑工程学院、北京工业大学建筑工程学院、北京工业大学建筑工程学院、北京工业大学建筑工程学院、北京工业大学建筑工程学院、北京工业大学建筑工程学院、北京工业大学建筑工程学院、北京工业大学建筑工程学院 |
更多格式 | 高清、无水印(增值服务) |