《表4 实时荧光定量PCR反应程序》

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《万寿菊育性相关基因SRAP分子标记开发》


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差异性条带测序获得的序列用Primer 5.0进行实时荧光定量引物设计,并进行实时荧光定量PCR扩增,反应体系:Green SYBRⅡ荧光定量酶10μL、DEPC水8μL、上下游引物各0.5μL、DNA模板1μL。反应程序为95℃预变性5 min;95℃变性10 s,54℃退火30 s,72℃延伸20 s,40个循环;72℃终延伸10 min;4℃保存(表4)。