《表1 燕麦ACCase基因与近缘物种的同源型对比》

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《利用CRISPR/Cas9技术对燕麦乙酰辅酶A羧化酶(ACCase)基因的编辑》

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以燕麦cDNA为模板，利用Primer Premier 5.0软件对小麦ACCase基因CT区序列进行分析并设计引物ACCase-1R、ACCase-1F进行PCR扩增。经检测条带清晰单一，条带大小约2 000 bp，与预测长度相符（图2）。切胶回收，通过TA克隆至载体pMD19-T，利用菌液PCR鉴定阳性克隆。测序后对结果进行分析，ACCase的CT区长度为2 188 bp。在NCBI网站上Blastn显示，与小麦、看麦娘等物种的ACCase相似度达90%以上（表1）。初步认为该序列即燕麦ACCase基因的CT区。